Descripción

Presta servicio a los grupos del IBVF y del exterior en la utilización del Citómetro de Flujo Influx, del Microscopio de Fluorescencia Leica DM6000 y del Microscopio de Fluorescencia Láser Confocal Leica SP2. El Servicio incluye el encendido y puesta en marcha del equipo y la asistencia técnica por el personal responsable del servicio.

Los usuarios del servicio microscopía confocal y citometría de flujo son del campo de la biología y medicina, principalmente, aunque de forma ocasional se han realizado estudio de materiales en microscopía confocal.

El tipo de muestra que se puede analizar con la microscopía confocal es muy variado. En nuestro servicio las muestras que usualmente analizamos son cultivos in vivo de cianobacterias o microalgas, tejidos vegetales (hojas, raíces y tallos) o plántulas enteras, cortes de tejidos vegetales y animales y superficie de metales.

Las aplicaciones más usuales suelen ser:

  • Localización subcelular de proteínas in vivo mediante el uso de fusiones con proteínas fluorescentes  (GFP, YFP; CFP…)
  • Estudios de expresión celular mediante fusión de promotores con genes reporter de proteínas fluorescentes.
  • Estudios de BIFC.
  • Detección de marcados inmunocitoquímicos en tejidos.
  • Análisis de Colocalización.
  • Obtención de secciones en serie para reconstrucción pseudo 3D y 3D.

Las  muestras que se analizan generalmente en nuestro servicio de citometría de flujo son  suspensiones celulares (microalgas, cianobacterias, células vegetales o animales) en medio acuoso.

Las aplicaciones más comunes que realizamos son:

  • Análisis de la distribución de tamaños y complejidad celular.
  •  Detección de tipos celulares determinados por medio del marcado con diferentes fluorocromos. Este marcado puede hacerse mediante anticuerpos que reconocen antígenos de superficie o expresando proteínas fluorescentes en el interior de las células.
  • Análisis del ciclo celular en una población mediante la detección de la cantidad de ADN presente en cada célula.
  • Separación de hasta cuatro poblaciones celulares a la vez, diferenciadas a partir de una suspensión celular. La separación se puede realizar en diferentes tipos de tubos, así como en diferentes tipos de placas multipocillos.
  • Obtención de clones celulares mediante separación de células individuales.